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| Nogo-66 蛋白的免疫原性研究－在体实验 |
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| 作者：岳红云 贺… 文章来源：第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科,贺翔鸽 重庆 400042) 点击数1448 更新时间：2007/6/20 9:46:24 文章录入：aya610 责任编辑：毛进 |
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| 目的：通过实验室研究证实，以大鼠Nogo基因cDNA为模板人工合成Nogo－66蛋白
具有明确的免疫原性，为通过T淋巴细胞介导的神经保护免疫治疗以及抗原-抗体结合抑
制内源性损伤抗原进行受损中枢神经保护提供初步依据；方法：以质粒
pET-46EK/LIC-Nogo-66原核表达和纯化后的Nogo-66蛋白粉剂无菌纯水稀释为0.1ug/ul
后, 选择健康成年8周龄Sprague Dawley （SD）大鼠，100ug/次、1次/7d进行免疫，无
菌纯水等量相同频度免疫注射进行对照；免疫后选择5d、7d、10d、14d、20d、28d、
36d、48d等不同时间段采集血清，应用联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）方法检测免疫前后实验动物的血清IgG滴度；分别于初
次免疫后4d、8d、16d、20d无菌分离实验动物脾淋巴细胞，淋巴细胞分层液纯化脾脏T
淋巴细胞后，流式细胞术检测分析细胞活化增殖情况，与对照组进行对比。结果：实验
组动物于Nogo-66蛋白抗原初次免疫后16～28d，特异性IgG滴度比对照组提高（P<0.05
），其后虽经第28天再次免疫，抗体滴度对比免疫后第20d无显著提高；而Nogo-66蛋白
抗原初次免疫后5～15d，流式细胞数证实T细胞增殖能力明显提高，S期细胞数与对照组
相比有显著性差异（P<0.05）。不同剂量Nogo-66蛋白抗原免疫后的实验组动物均无试
验性免疫反应性脑脊髓膜炎发生。结论：通过Nogo－66蛋白进行动物接种免疫，能够同
时提高接种动物的细胞免疫及体液免疫水平，在体实验证实Nogo－66蛋白免疫原性明
确。不仅刺激机体产生特异性抗体，并且能够刺激神经保护性免疫反应主要介导T淋巴
细胞增殖，可用于通过免疫治疗达到神经保护作用的进一步研究。对于RGCs损害为主要
表现的青光眼神经损伤的免疫保护治疗提供了新的思路。
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