| [目的] 探讨脂质体介导的重组荧光pEGFP-C3-AntiRARβ表达载体抑制豚鼠巩膜成纤维细胞和视网膜RARβmRNA表达的可行性。
[方法] 采用基因分析软件，设计表达反义RARβ的区段并基因测序鉴定。构建重组荧光pEGFP-C3-AntiRARβ表达载体。豚鼠36只随机分为4组，右眼为实验眼，左眼为对照眼。实验眼玻璃体腔注射脂质体介导的重组pEGFP-C3-AntiRARβ质粒，分别于注射后3天、1周、两周和4周后冰冻切片，荧光显微镜下观察视网膜绿色荧光蛋白的表达。利用脂质体介导的重组荧光pEGFP-C3-AntiRARβ表达载体转染豚鼠巩膜成纤维细胞，荧光显微镜下观察豚鼠巩膜成纤维细胞绿色荧光蛋白的表达。应用RT-PCR检测转染后的豚鼠巩膜成纤维细胞和视网膜中RARβmRNA的表达水平。
[结果] 重组反义pEGFP-C3-AntiRARB载体经酶切鉴定结果正确；测序分析证实插入的反义RARβ的区段方向及序列正确。荧光显微镜下可见豚鼠巩膜成纤维细胞和视网膜绿色荧光蛋白的表达。RT-PCR分析，与对照组相比，重组pEGFP-C3-AntiRARB转染后的豚鼠巩膜成纤维细胞和视网膜中RARβmRNA的表达水平明显降低( t=-37.026, -59.290, -32.650, -8.686, P<0.05)。
[结论]设计反义RARβ基因片段，成功构建pEGFP-C3-AntiRARB表达载体，并将之转染到豚鼠巩膜成纤维细胞和视网膜。通过脂质体介导的RARβ反义RNA，能够抑制豚鼠巩膜成纤维细胞和视网膜RARβmRNA的表达。为研究高度近视的发病机制和基因治疗提供了新的思路和手段。
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