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    人工视神经促进视神经再生的研究         
    人工视神经促进视神经再生的研究
    作者:方媛 文章来源:上海市复旦大学眼耳鼻喉科医院眼科 点击数:1826 更新时间:2008/2/13
    人工视神经促进视神经再生的研究 方媛 莫晓芬 孙兴怀 郭文毅 田洁 张萌 董京艳 上海复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科(200031) 目的:探讨CNTF基因活体转染视网膜视神经节细胞(retinal ganglion cells, RGCs)联合移植人工神经导管能否促进成年大鼠的视神经再生。方法:构建CNTF-GFP质粒,用电穿孔法将其转染入雪旺细胞中,并以RT-PCR及免疫组化检测其CNTF表达情况。在成年大鼠玻璃体内注射CNTF质粒,并以电穿孔法辅助转染到RGCs,7天后将大鼠球后视神经切断并在断端缝接一根长1.1cm的人工神经导管(由转染CNTF基因的雪旺细胞填充在PLGA导管中所构成)。4周后,行DiI逆行标染标记轴突再生的RGCs并计数。行人工视神经导管冰冻切片,免疫组化标染神经特异性标记物NF, 再生相关蛋白GAP-43、NCAM。电镜观察再生轴突的超微结构。结果:RT-PCR及免疫组化证实雪旺细胞电穿孔转染基因后CNTF表达增加,视网膜铺片可见被DiI标染RGCs, 且实验组明显多于对照组。人工视神经切片中可见GAP-43, NF染色阳性的再生神经纤维,且NCAM的表达也明显增加。电镜观察证实人工神经导管中存在再生神经纤维。结论:CNTF基因活体转染RGCs并联合人工神经导管移植能够促进成年大鼠视神经的再生。本研究受国家自然科学基金(30300379)资助。

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