目的  研究贝伐单抗（anti-VEGFA, Avastin）对大鼠结膜成纤维细胞生长曲线的影响，以及对结膜成纤维细胞中血管内皮生长因子、炎症因子表达的影响。

方法 以离体培养的大鼠第五代结膜成纤维细胞（FBs）为对象，在96孔板中加入不同浓度的贝伐单抗干预FBs生长。贝伐单抗的终浓度分别为12.5mg/ml、2.5mg/ml、1.25mg/ml、0.5mg/ml、0.05mg/ml、0.005mg/ml，并设置5个复孔。观察时点为第1天、第2天、第4天、第6天、第8天、第10天。分别以MTT法检测FBs生长状况，绘制不同浓度贝伐单抗干预下FBs的生长曲线。以2.5mg/ml（最适干预浓度）的贝伐单抗干预6孔板培养的第六代FBs细胞，提取培养48小时 FBs细胞的mRNA。通过反转录合成cDNA。利用荧光定量PCR反应仪进行PCR扩增及检测，绘制标准曲线对扩增效率进行检验及熔解曲线对扩增特异性进行检验。对VEGF₁₆₄，VEGFR1(Flt-1), VEGFR2(Flk1)，TGFβ1，TGFβ2行荧光定量PCR检测，根据扩增曲线及ddCt值进行统计，检测五种基因的mRNA表达丰度变化。

结果 1.对处于对数生长期的FBs按照不同浓度梯度进行贝伐单抗干预后显示，终浓度为2.5mg/ml的 贝伐单抗对FBs生长具有更显著的抑制作用。终浓度为12.5mg/ml的贝伐单抗干预后，FBs在24小时内死亡。2.贝伐单抗(2.5mg/ml)干预培养结膜FBs的荧光定量PCR结果：(1) 对数生长期的大鼠结膜FBs中，VEGF₁₆₄、VEGFR1、VEGFR2、TGFβ2 mRNA表达均显著增加，而TGFβ1 mRNA表达变化不明显且不受贝伐单抗影响。(2) 2.5mg/ml 贝伐单抗干预后48小时，各细胞因子的mRNA表达丰度均较对照组显著降低，其中以VEGF₁₆₄（45%）和TGFβ2(25%)抑制更为显著。

结论 1.贝伐单抗可明显抑制体外培养的对数生长期大鼠结膜成纤维细胞的生长，下调血管内皮生长因子和炎症因子的表达。2.非血管化（成纤维细胞）途径可能参与贝伐单抗抑制滤过术后瘢痕化的过程。